Prensip debaz nan sentèz ADN

Sentèz ADN chimik la baze sou estrateji sentèz solid-faz ak chimi fosforamidit.Diferan de sentèz ADN byolojik la, materyèl la nan sentèz ADN chimik se DMT (4, 4-dimethoxytrityl) ak phosphoramidite modifye deoxyriboxyside, jan yo montre nan Figi 1. Se sentèz ADN la te pote soti sou sipò solid la (nou ka ofri divès kaliteKolòn Sentèz Oligo), sa vle di CPG (kontwole vè pò) ak PS (polystyrène), epi tout sentèz la fèt sou yonADN/RNA sentèz, ki se ekipman prensipal nou an, gen diferan modèl tankou: HY Single Channel Synthesizer, HY-12, HY-192 ak elatriye, direksyon sentèz la se soti nan 3 'a 5', ak yon nukleotid prezante nan sipò solid la atravè yon sèl. sik sentèz.Yon sik tipikman sentèz gen kat etap, Depwoteksyon, Couplage, Limitasyon ak Oksidasyon (Figi 2).Depwoteksyon an mete pou retire gwoup DMT sou sipò solid la oswa gwoup hydroxyl 5' sou nukleozid anvan an, se 3% trichloroacetic asid nan dichloromethane ki itilize kòm reyaktif deprotection.Lè sa a, phosphoramidite modifye deoxyriboxyside te pèmèt pou ekspoze hydroxyl gwoup ak asistans activateur, c'est-à-dire 5-ethylthiotetrazole oswa 4, 5-dicyanoimidazole, fòme phosphitetriester (III), ak reyalize etap Couplage.Yon etap Capping te pote soti pou bloke gwoup idroksil ki pa reyaji pandan etap kouple, pou minimize fòmasyon sekans defo endezirab.Finalman, fosfittriester enstab (III) soksid nan fosfortriester ki estab chimik (V) ak yòd kòm oksidan nan prezan an nan piridin.

ADN sentèz la ta ka klivaj soti nan sipò solid pa aminoliz, gwoup la pwoteje 2-cyanoethyl sou fosfortriester la ak amid la sou nucleobase la se klivaj nan menm tan an, plak yo sentèz ak kolòn sentèz nan etajè yo mete dirèkteman nan chanm reyaksyon an. nan laEkipman depwoteksyon.ADN brit ta ka prepare pa HPLC, elektwoforèz ak OPC sou demann, nou ka bay ou touEkipman pou pirifyepou Post-tretman.