Faktè ki detèmine efikasite nan sentèz ADN

Nan sentèz tipik ADN, RNA ak asid nikleyik ki pa natirèl, etap Depwoteksyon ak Coupling jwe yon wòl enpòtan.

Etap depwoteksyon an se retire gwoup DMT sou sipò solid la oswa gwoup idroksil 5 'sou nukleozid anvan an ak asid òganik, epi ekspoze gwoup idroksil la pou etap kouti sa a.Se 3% asid trichloroacetic nan dichloromethane oswa toluèn sitou itilize pou pote soti nan etap depwoteksyon an.Konsantrasyon nan asid trichloroacetic ak tan an depwoteksyon (tan deblocking) domine pite a nan pwodwi final yo.Konsantrasyon ki ba ak tan debloke ensifizan kite gwoup DMT ki pa reyaji, ki diminye pwodiksyon an ak ogmante enpurte yo vle.Tan an debloke long ka mennen depurine nan sekans sentèz, fòme enpurte yo inatandi.

Etap Coupling la sansib a kontni dlo nan Solvang ak imidite nan lè a.Konsantrasyon dlo nan sentèz la ta dwe mwens pase 40 ppm, pi bon mwens pase 25 ppm.Pou kenbe kondisyon sentèz anidrid la, sentèz asid nikleyik yo ta dwe fèt nan yon anviwònman imidite ki ba, kidonk nou rekòmande kliyan nou yo sèvi ak la.Amidites Dissoud Ekipman, ki ka fonn Phosphoramidite an poud oswa lwil nan acetonitrile anidrid pou fè pou evite kontak ak lè.

Faktè ki detèmine efikasite sentèz ADN5
Faktè ki detèmine efikasite sentèz ADN4

Depi fonn fosforamidit li pi bon nan sitiyasyon ki pa dlo a, ak pyèj molekilè pou adsorbe dlo tras nan reyaktif yo ak amidit, li bezwen prepare.Pyèj molekilè.Nou rekòmande 2 g subsieve pou boutèy reyaktif 50-250ml, 5g pou boutèy reyaktif 250-500ml, 10g pou boutèy reyaktif 500-1000ml, ak 20g pou boutèy reyaktif 1000-2000ml.

Fonn fosforamidit yo ta dwe fèt anba atmosfè inaktif la, epi ranplase reyaktif activateur ak asetonitrile yo ta dwe fini nan tan.Yo ta dwe itilize reyaktif capping ak oksidasyon pi vit ke posib, reyaktif yo louvri bay mwens etajè lavi, ak mwens aktivite pandan sentèz.


Tan pòs: Aug-09-2022